白介素试剂盒在的实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。
如双抗体夹心法、间接法、竞争法、双位点一步法、捕获法测IgM抗体、应用亲和素和生物素的ELISA。白介素试剂盒TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品的浓度。
白介素试剂盒的详细操作规程：
1、使用前请先将试剂盒在室温下平衡半小时。
2、空白孔不加样，只加显色剂A，B和终止液用于调零。
3、标准品孔：每孔加入稀释好的标准品50μl，零孔加入标准品/样品稀释液50μl，然后加入生物素抗原工作液50μl(零孔必须要做，并将其作为标曲的后一个点)。
4、样品孔：加入样品50μl（推荐直接加样，浓度高可以用样品稀释液稀释2-5倍），然后加入生物素抗原工作液50μl。
5、轻轻摇晃，盖上封板膜，37℃培养箱中孵育30min。
6、将25倍浓缩洗涤液用蒸馏水25倍稀释后备用。
7、次洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
8、加入50μl亲和素-HRP到标准品孔和样品孔中，轻轻摇晃，盖上封板膜，37℃培养箱中孵育30min。
9、第二次洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
10、显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟。
11、终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色)。
12、测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后10分钟以内进行。
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