应用实例

一、FAOBlue及其香-豆-素衍生物的吸收光谱和荧光光谱

在PBS缓冲液（pH 7.4）中，FAO代谢后释放的FAOBlue和香-豆-素衍生物的吸收光谱（左）、荧光光谱（右）。

FAOBlue经过FAO转化为香-豆-素衍生物后，吸收峰从FAOBlue发生偏移至405 nm。因此，在405 nm的激发条件下，FAOBlue不会发出荧光，只有在通过FAO释放香-豆-素衍生物时才会发出蓝色荧光。

注：FAOBlue在300-380 nm（最大350 nm）激发时显示蓝色荧光（灰色线，370-450 nm），所以在选择滤光片时请格外注意，避免同时激发未反应的FAOBlue以及FAO反应后的香-豆-素衍生物。

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二、各种癌细胞中FAO活性可视化

在4种癌细胞中加入FAOBlue，培养一定时间后进行荧光观察。所有细胞都出现蓝色荧光，而经过FAO抑制剂etomoxir处理后蓝色荧光显著减少。这些数据表明，蓝色荧光是由活细胞中FAO活性引起的。（注：实验条件根据细胞类型不同而不同）

※HepG2 : 5 μM, 30 min、 LNCaP: 20 μM, 120 min、HeLa : 20 μM, 120 min、A549 : 5 μM, 30 min

三、药物对FAO活性的干扰

对HepG2细胞分别进行AICAR（通过 AMPK 激活的 FAO 激活剂）和ranolazine（部分 FAO 抑制剂）处理，随后加入FAOBlue（5uM）孵育30分钟。结果显示，与对照细胞（未处理）相比，AICAR处理后明显增加蓝色荧光强度，ranolazine处理后则明显降低蓝色荧光强度。

四、药物对FAO活性影响的定量分析

将HepG2细胞与不同浓度的ND630预孵育4小时。ND630处理后，加入FAOBlue（5uM）孵育30分钟。结果表明，伴随ND630浓度增加，蓝色荧光强度随之增加。由此可知，ND630可增强FAO活性。（注：ND630是乙酰-CoA羧化酶抑制剂，被认为是治疗非酒精性脂肪肝（NAFLD）的潜在药物）

五、NASH模型小鼠的FAO活性分析

非酒精性脂肪性肝炎（NASH）是一种与脂质相关的疾病，表现为脂肪酸代谢活性低。向正常小鼠和NASH模型小鼠以口服形式给药增强脂质代谢的bezafibrate后，提取原代肝细胞。向各组细胞加入FAOBlue（5 μM）观察其FAO活性，结果显示，相较正常小鼠来源细胞，NASH模型小鼠来源细胞的FAO活性明显被抑制。另外，给药bezafibrate的NASH模型小鼠来源细胞中FAO活性被恢复。

产品文献

Uchinomiya et al., Chem. Commun., 56, 3023-3026 (2020) Fluorescence Detection of Metabolic Activity of Fatty Acid Beta Oxidation Activity in Living Cells.

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